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[考博复习资料]生物化学名词解释:等电点(计算、测定、沉淀、聚焦)_考博_旭晨教育

小编为广大考生整理了生物化学人卫7版名词解释,希望对大家考博复习有所帮助,下面是 等电点 (isoelectric point, pI)相关名词解释以及试题范例。

等电点是什么

(isoelectric point, pI) 氨基酸分子带有相等正、负电荷时,溶液的 pH 值称为该氨基酸的等电点

肽键 (peptide bond) : 是由一个氨基酸的 a- 羧基与另一个氨基酸的 a- 氨基脱水缩合而形成的化学键。

等电点如何计算

公式 : 亨德森哈塞尔巴尔赫方程 = 6.1 + log ((HCO3)/(0.0301*PaCo2))

在某一 pH 的溶液中,氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等,成为兼性离子,呈电中性,此时溶液的 pH 称为该氨基酸的等电点。

等电点测定方法

等电点是蛋白质的一个重要性质,测定等电点的方法是在不同 pH 条件下测量蛋白质的电泳迁移率,然后用迁移率对 pH 作图,对应于迁移率为零的 pH 就是蛋白质的等电点。按照蛋白质等电点不同而进行分离的电泳方法称为蛋白质等电聚焦电泳。由于其分辨率可达到 0.01pH 单位,故特别适用于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分。

等电点沉淀法

在等电点时,蛋白质分子以两性离子形式存在,其分子净电荷为零 ( 即正负电荷相等 ) ,此时蛋白质分子颗粒在溶液中因没有相同电荷的相互排斥,分子相互之间的作用力减弱,其颗粒极易碰撞、凝聚而产生沉淀,所以蛋白质在等电点时,其溶解度最小,最易形成沉淀物。等电点时的许多物理性质如黏度、膨胀性、渗透压等都变小,从而有利于悬浮液的过滤。

等电点聚焦

等电点聚焦就是在电泳槽中放入载体两性电解质,当通以直流电时,两性电解质即形成一个由阳极到阴极逐步增加的 pH 梯度,当蛋白质放进此体系时,不同的蛋白质即移动到或聚焦于与其等电点相当的 pH 位置上。

等电点试题范例

1 求二肽 Lys-Lys 和三肽 Lys-Lys-Lys 的等电点。已知 Lys 的α - 氨基的 pKa 2.18 pkb 8.95,pk ε 10.53

2 、计算 Lys-Ala-Glu-Gly-Lys-Lys 的等电点。已知 Lys 的α - 氨基的 pKa 8.95 ,ε - 氨基的 pKa 10.53 Glu 的α - 羧基的 pKa 2.19 ,γ - 羧基的 pKa 4.25

3 、有一个蛋白质拥有 30 个侧链羧基( pKa 4.3 ), 10 个咪唑基团( pKa 7.0 ), 15 ε - 氨基( pKa 10.0 )。求该蛋白质的等电点。

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